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ClonExpress Ultra One Step Cloning Kit

C115
 
     
PN Product Name Size Price (TWD)
C115-01 ClonExpress Ultra
One Step Cloning Kit
25 rxn 10,815
C115-02 ClonExpress Ultra
One Step Cloning Kit
50 rxn 17,430
 

 
   優勢   

•  快速:5 - 15min快速重組;
•  簡單:一管式Mix,操作簡便;
•  高效:高效克隆50 bp~10 kb片段,陽性率>95%;
•  相容:單片段、多片段、入門克隆三合一;
•  零背景:提供零背景、
Ampicillin / Kanamycin 雙抗性載體;​
 

   說明   
ClonExpress Ultra One Step Cloning Kit是新一代的重組克隆試劑盒,可快速高效的將1-5個片段定向克隆至任意載體的任意位點,高度優化的2×ClonExpress Mix,50℃反應5-15 min完成重組,操作簡單快捷。​

  實驗案例   
高度簡化的實驗流程
通過PCR擴增,使插入片段5’和3’最末端分別帶有和線性化載體兩末端一致的序列(15 - 20 bp)。用2×ClonExpress Mix,50℃反應5-15 min,進行重組。重組產物直接轉化感受態細胞,平板上會形成數百個單克隆供陽性篩選。

ClonExpress Ultra單片段同源重組原理圖



優異的克隆效率
試劑盒能夠高效克隆50 bp-10 kb片段,不同長度單片段50 bp、2 kb、4.5 kb、7.5 kb、10 kb;多片段:四個片段(3 kb)、三個片段(10 kb)、五個片段(3 kb)、五個片段(6 kb),純化後分別與pCE-Zero vector進行同源重組,重組產物轉化化學感受態細胞DH5α(Vazyme #C502),菌落數如下圖所示。
試劑盒獨特的非連接酶依賴體系,無載體自連,克隆陽性率高達95%以上。重組產物轉化平板後,各挑取50個單克隆進行菌落PCR鑒定,不同長度插入片段陽性率如下圖所示。

廣泛的體系相容性
試劑盒相容1至5個片段同源重組,搭配Vazyme高保真酶,PCR產物可不經過純化直接進行克隆。重組產物轉化化學感受態細胞DH5α(Vazyme #C502),XL10(Vazyme #C503),Fast-T1(Vazyme #C505),得到較高克隆效率。
 

載體序列資訊及測序方案​



   文獻發表   

• Wu N, Ming X, et al. TBX6 null variants and a common hypomorphic allele in congenital scoliosis. N Engl J Med, 2015, 4793:341-350. IF : 54.42
• Ge J, Li W, et al. Architecture of the mammalian mechanosensitive Piezo1 channel. Nature, 2015, 527(7576):64. IF : 42.351

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